Fermentasi adalah proses penghasil energy utama dari berbagai mikroorganisme yang bersifat anaerob. Sifat anaerob ada yang bersifat obligat (absolut) artinya mokroorganisme tersebut akan mati bila diberi oksigen. Ada yang bersifat anaerob fakultatif yaitu mereka dapat hidup dengan atau tanpa oksigen.
Dalam kondisi anaerob, asam piruvat tidak diubah mcnjadi Asetil-KoA, tetapi mereka akan berubah menjadi etanol. Enzim yang mengkatalisis adalah karboksilase dan dehidrogenase.
Dalam reaksi ini untuk 1mol asam piruvat menjadi etanol dibutuhkan 1 mol NADH2 (3-ATP). Sehingga untuk mengubah 2mol glukosa menjadi 2 mol piruvat dan 2mol etanol dibutuhkan 6 ATP. Dalam rangkaian glokolisis dihasilkan 8 ATP. Sehingga dalam fermentasi glukosa menjadi alkohol hanya dihasilkan 2 ATP. Dengan kata lain fermentasi merupakan penghasil energi yang tidak efisien.